Hemos analizado la influencia de dos tipos de barreras sobre una población de lobos en un área agrícola de Castilla y León. Las barreras son: 1) La autovía A-6, de 4 carriles, vallada y sin pasos específicos para el ganado o la fauna, en un tramo de cultivo, llano y desarbolado; y 2) un corredor humanizado a lo largo del río Duero (que tiene 50-100 m de anchura en el tramo estudiado), que incluye una carretera nacional con dos carriles y sin vallar, una línea de ferrocarril, dos canales y dos bandas desarboladas de 500 metros de anchura con casas dispersas en ambos lados del río. Desde enero de 1998 hasta junio de 1999, cruzaron la autovía estudiada los cuatro lobos radiomarcados que vivieron más de un mes a menos de 15 km de ésta, en diferentes fases de su vida. Los lobos territoriales en sus distintas fases atravesaron la autovía entre el 4,4 y el 39,3% de los días en que fueron localizados, mientras que los dos lobos flotantes seguidos lo hicieron entre el 22,2 y el 23,6%. Asimismo, hemos radiomarcado 8 lobos a menos de 5 km del río Duero. Entre marzo de 1997 y marzo de 1999 (que incluyen 184 días de seguimiento) sólo detectamos un cruce. Entre mayo y agosto de 1999, tres lobos cruzaron el río el 42,7% de los 75 días de seguimiento. Nuestros resultados sugieren que en lugares similares a nuestra área de estudio, donde los lobos están acostumbrados a las actividades humanas, las autovías simples no parecen capaces de fragmentar poblaciones saludables de lobos. Sin embargo, una acumulación de obstáculos puede generar un efecto sinérgico, produciendo un efecto barrera superior que la suma de cada una por separado. De esta manera, el río Duero y las infraestructuras que lo flanquean por cada lado parecen haber retrasado la expansión de la población española de lobos durante casi dos décadas. Palabras clave: Barrera, Dispersión, Seguimiento, Autopista, Río, Lobo